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BaculovirusInsect ExpressionSystem
桿狀病毒-昆蟲表達系統
桿狀病毒-昆蟲表達系統

桿狀病毒表達系統(Baculovirus expression vector system,BEVS),憑借其穩定的實驗體系、高表達水平及翻譯后修飾功能而被普遍認可為是一種表達大規模蛋白的強有力的工具。BEVS可以同時表達多個外源基因,在分泌生物活性蛋白的同時增加產量,還可以提供高活性的重組蛋白,解決在其它體系中無法解決的蛋白活性困難。  

服務優勢

高表達水平:能夠實現高水平的蛋白質表達,可達到昆蟲細胞的天然表達水平。

大容量表達載體:桿狀病毒表達載體具有較大的容量,可容納較大的目標蛋白質基因。

蛋白質折疊和修飾能力:桿狀病毒表達系統具有昆蟲細胞的蛋白質折疊和修飾機制,可實現復雜蛋白質的正確折疊和修飾。

翻譯后修飾:昆蟲細胞能夠進行正確的翻譯后修飾,如糖基化和脂負載。

適用于多種昆蟲細胞:桿狀病毒可以感染多種昆蟲細胞,包括昆蟲細胞系和昆蟲體內的細胞。

服務內容如下
服務項目內容交期
全基因合成分析基因序列,優化密碼子,合成目的基因,提供載體1-2周
重組質粒的構建選用合適的載體,合適的標簽(eg:His,GST,Fc,SUMO)構建重組供體質粒“pfastbacⅠ-target”(target代表目標基因)1周
重組桿粒的制備轉化重組供體質粒至DH10bac感受態細胞,藍白斑篩選陽性克隆并使用PCR反復鑒定,最后堿裂解小提重組桿粒1周
細胞轉染復蘇并傳代懸浮培養的SF21細胞,使用化學轉染試劑將重組桿粒轉染入SF21細胞以制備P1代重組桿狀病毒1周
重組蛋白的表達利用P1代桿狀病毒制備P2代病毒、利用P2代病毒侵染大規模培養的SF21細胞以表達重組蛋白1周
重組蛋白的分離純化及QC檢測選用合適的色譜方法(eg:親和、離子、分子篩等)分離純化重組蛋白,并超濾換液至客戶指定的緩沖液(如無特殊要求最終的保存緩沖液選擇PBS或Tris-HCl)。QC檢測包括:SDS-PAGE電泳檢測重組蛋白純度、BCA定量重組蛋白的濃度、Western-blot檢測1周
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