DNA測(cè)序（DNA sequencing，或譯DNA定序）是指利用一定的實(shí)驗(yàn)室方法分析特定DNA片段的堿基序列，也就是腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C）與鳥(niǎo)嘌呤的（G）排列方式。快速的DNA測(cè)序方法的出現(xiàn)極大地推動(dòng)了生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的研究和發(fā)現(xiàn)。
DNA測(cè)序有助于了解人類基因組、其他動(dòng)物、植物和微生物的完整DNA序列，為進(jìn)一步研究和改造目的基因提供了科學(xué)基礎(chǔ)，極大地推動(dòng)了生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的研究及發(fā)現(xiàn)，近幾年來(lái)已經(jīng)被快速應(yīng)用在眾多領(lǐng)域，如疾病診斷、微生物鑒定、法醫(yī)生物學(xué)、生物技術(shù)、生物系統(tǒng)學(xué)等。
生成互相獨(dú)立的若干組帶放射性標(biāo)記的寡核苷酸，每組寡核苷酸都有固定的起點(diǎn)，但卻隨機(jī)終止于特定的一種或者多種殘基上。 由于DNA上的每一個(gè)堿基出現(xiàn)在可變終止端的機(jī)會(huì)均等，因此上述每一組產(chǎn)物都是一些寡核苷酸混合物，這些寡核苷酸的長(zhǎng)度由某一種特定堿基在原DNA全片段上的位置所決定。 在可以區(qū)分長(zhǎng)度僅差一個(gè)核苷酸的不同DNA分子的條件下，對(duì)各組寡核苷酸進(jìn)行電泳分析，只要把幾組寡核苷酸加樣于測(cè)序凝膠中若干個(gè)相鄰的泳道上，即可從凝膠的放射自影片上直接讀出DNA上的核苷酸順序。
| DNA常規(guī)測(cè)序 | 復(fù)雜結(jié)構(gòu)測(cè)序 | 噬菌體測(cè)序 | Primer Walking |
|---|---|---|---|
| 對(duì)于常規(guī)的未知濃度的測(cè)序樣品，您可以選擇此項(xiàng)服務(wù)。 樣品的類型包括質(zhì)粒、PCR產(chǎn)物（已純化PCR或無(wú)雜帶的PCR原液）、菌體（平板克隆或甘油菌）、具有環(huán)狀基因組的噬菌體（上清液或噬菌斑）。 | 由于二級(jí)結(jié)構(gòu)或者其它內(nèi)在因素的影響，復(fù)雜結(jié)構(gòu)對(duì)于測(cè)序是巨大的挑戰(zhàn)。常規(guī)的測(cè)序方案往往容易出現(xiàn)提前中斷或者測(cè)序結(jié)果紊亂的現(xiàn)象。 以下幾種序列特點(diǎn)的樣品適合針對(duì)復(fù)雜結(jié)構(gòu)的測(cè)序方案： 高GC含量：GC含量>60%的模板，或者局部高GC含量的模板 發(fā)夾結(jié)構(gòu)：包含兩個(gè)反向重復(fù)序列，兩個(gè)重復(fù)序列之間間隔至少3個(gè)堿基 重復(fù)序列：2個(gè)或3個(gè)堿基的多個(gè)連續(xù)重復(fù)。 DNA發(fā)卡結(jié)構(gòu)及RNAi 模板測(cè)序 RNA干擾（RNAi）是指雙鏈RNA（dsRNA）介導(dǎo)的特異性抑制某相關(guān)基因表達(dá)的一種機(jī)制。它逐漸發(fā)展為一種研究基因功能的快速有效的新興技術(shù)。 RNAi模板，由于其存在 “發(fā)卡結(jié)構(gòu)”，給測(cè)序工作帶來(lái)了很大挑戰(zhàn)。在RNAi研究中采用的小發(fā)卡RNA（shRNA）通常無(wú)法測(cè)序成功，測(cè)序結(jié)果往往提前中斷或者信號(hào)紊亂。三羊開(kāi)肽擁有專門針對(duì)shRNA模板的測(cè)序方案，測(cè)序結(jié)果得到客戶的一致認(rèn)可。 | 三羊開(kāi)肽的測(cè)序方案可以對(duì)環(huán)狀基因組的噬菌體（噬菌體上清或者噬菌斑）直接測(cè)序。當(dāng)難以獲得足夠量的測(cè)序用噬菌體DNA樣品時(shí)，該操作為您省掉DNA制備的繁瑣過(guò)程，并能獲得高質(zhì)量的測(cè)序結(jié)果。 本項(xiàng)服務(wù)包括: ·節(jié)約時(shí)間和成本-無(wú)需菌液培養(yǎng)和DNA制備 ·ABI3730xl DNA序列分析儀進(jìn)行序列分析 ·Phred20有效長(zhǎng)度大于600bp ·免費(fèi)提供三羊開(kāi)肽通用引物 ·您可以選擇在線提交訂單，三羊開(kāi)肽CLIMS系統(tǒng)將長(zhǎng)期保存您的訂單信息以及測(cè)序結(jié)果: ·三羊開(kāi)肽的技術(shù)支持會(huì)針對(duì)項(xiàng)目中的問(wèn)題及時(shí)與您溝通 | 三羊開(kāi)肽可以通過(guò)Primer Walking測(cè)序，幫助您獲得未知克隆的序列信息，或者驗(yàn)證克隆序列的準(zhǔn)確性。如果您提供參考序列，我們可以一次完成長(zhǎng)片段克隆的全長(zhǎng)測(cè)序。 本項(xiàng)服務(wù)包括: ·引物設(shè)計(jì)并合成 ·根據(jù)序列圖譜進(jìn)行人工編輯 ·序列拼接 ·發(fā)送拼接序列結(jié)果 |
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