蛋白質的純化是生物化學研究中非常重要的一步，純化蛋白質可以用于結構解析，功能研究，動態過程研究等各種生物學實驗，為了獲得大量的目的蛋白，我們可以通過基因工程技術將編碼蛋白的核酸序列導入到宿主細胞，使其大量表達，那么蛋白純化的詳細步驟有哪些呢？今天小編在下面給大家做詳細的解答。
蛋白純化詳細步驟主要包括前處理，粗分離和精分離三個階段：
前處理階段：通常選擇適當的緩沖溶液劑把蛋白質提取出來，抽提所用緩沖液的PH、離子強度、組成成分等條件去選擇，緩沖液一般加入表面活性劑，使其膜結構破壞，利于蛋白質與膜分離，在抽提過程中，需要注意溫度，避免劇烈攪拌，防止蛋白質的變性，這一階段的目標主要是將蛋白質從原始的組織或細胞中釋放出來，同時保持其天然狀態和生活活性。
粗分離階段：在這一步，蛋白質提取液（可能還含有核酸、多糖等雜質）通過超濾、鹽析、等電點沉淀和有機溶劑分級分離等方法進行初步分離，通過調節鹽濃度將目的蛋白沉淀解析出來。
精分離階段：經過粗分離后，樣品體積減小，大部分的雜質也被去除，需要進一步分離提純才能得到一定純度的樣品，常用的純化方法有：凝膠過濾層析、離子交換纖維素層析、親和層析等等，最后就是通過物理方法對蛋白質含量進行測定。
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